De heldergroene agar Het is een solide kweekmedium, met een hoge mate van selectiviteit. Het wordt uitsluitend gebruikt voor de isolatie van stammen van het geslacht Salmonella, maar er zijn enkele uitzonderingen, zoals de typhi- en paratyphi-soorten die niet in dit medium groeien..
De zoektocht naar het geslacht Salmonella komt veel voor in ontlasting, water of voedselmonsters. In die zin kan dit medium erg handig zijn. Deze agar werd in 1925 gemaakt door Kristensen, Lester en Jurgens, later werd hij aangepast door Kauffmann.
Het is samengesteld uit pluripeptonen uit peptische vertering van dierlijk weefsel en pancreasvertering van caseïne, het bevat ook gistextract, natriumchloride, lactose, sucrose, fenolrood, heldergroen en agar-agar..
Het wordt gekenmerkt doordat het een nogal onherbergzame omgeving is voor de meeste bacteriën, wat de groei van salmonella bevordert, hoewel sommige coliformen erin kunnen bestaan en zich zwak ontwikkelen..
Het is belangrijk op te merken dat het geslacht Shigella niet groeit in deze omgeving en ook niet Salmonella typhimurium, geen van beide Salmonella paratyphi. Als u deze micro-organismen wilt isoleren, moet u daarom andere media gebruiken, zoals onder andere XLD-agar..
Artikel index
Elk van de componenten waaruit het medium bestaat, vervult een specifieke functie die de kenmerken en eigenschappen van de agar bepaalt..
Pluripeptonen en gistextract zijn de bron van voedingsstoffen waaruit micro-organismen de stikstof en mineralen halen die nodig zijn voor hun ontwikkeling. Lactose en sucrose zijn energiebronnen voor micro-organismen die ze kunnen fermenteren..
Heldergroen is de remmende stof die de groei van Gram-positieve bacteriën en een groot aantal Gram-negatieve micro-organismen voorkomt..
Natriumchloride geeft osmotische stabiliteit aan het medium. Hoewel fenolrood de pH-indicator is, verandert het van kleur bij het detecteren van de productie van zuren door de fermentatie van koolhydraten..
De niet-fermenterende kolonies lactose en sucrose groeien op dit medium in een roze of doorzichtige witte kleur, op een rode achtergrond. Bijvoorbeeld bacteriën van het geslacht Salmonella.
Terwijl lactose- of sucrose-fermenterende bacteriën die op dit medium kunnen groeien, groenachtig gele of geelachtig groene kolonies ontwikkelen op een groenachtig gele achtergrond. Bijvoorbeeld, Escherichia coli en Klebsiella pneumoniae.
Er zijn andere varianten van heldergroene agar; Novobiocin Brilliant Green Glucose (NBG) Agar en Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose (NBGL) Agar.
Bevat trypticase-soja-agar, ijzer-ammoniumcitraat, natriumthiosulfaat-pentahydraat, fenolrood, glucose, heldergroen, novobiocine en gedestilleerd water.
Het wordt gebruikt voor het isoleren van Salmonella-kolonies uit ontlastingsmonsters.
In dit geval zijn heldergroen en novobiocine de remmende stoffen die de groei van grampositieve bacteriën en sommige gramnegatieve micro-organismen voorkomen..
Natriumthiosulfaat is de bron van sulfide en ijzercitraat is de bron van ijzer, beide nodig om de productie van waterstofsulfide te onthullen door de vorming van een zwart ijzer (III) sulfideprecipitaat..
Glucose is het fermenteerbare koolhydraat en fenolrood is de pH-indicator..
In dit medium ontwikkelen Salmonella-kolonies zich groot met een zwart centrum omgeven door een roodachtige halo en gevolgd door een duidelijk zichtbaar gebied. Sommige soorten Citrobacter freundii produceren kolonies die identiek zijn aan Salmonella.
Dit medium bevat trypticase-soja-agar, ijzerammoniumcitraat, natriumthiosulfaat, lactose, glycerol, heldergroen, novobiocine en gedestilleerd water..
Het verschil tussen dit medium en het vorige is dat glucose wordt vervangen door lactose en glycerol en fenolrood wordt niet gebruikt..
Het medium wordt ook gebruikt om Salmonella-soorten te isoleren, de kolonies worden zwart door de productie van waterstofsulfide.
Alleen kolonies die geen zuur uit glycerol of lactose produceren, bereiken de H-productietweeHet is voldoende, omdat de lage pH de vorming van H verstoorttweeS. Dit resulteert in kleurloze kolonies voor de meeste Proteus- en Citrobacter-soorten..
-Weeg 58 gram van het commercieel verkregen gedehydrateerde medium af. Voeg het toe aan een liter herdistilleerd water. Meng, laat een paar minuten staan en plaats het preparaat onder een warmtebron tot het volledig is opgelost..
-Autoclaaf bij 121 ° C gedurende 15 minuten, overschrijd de sterilisatietijd niet.
-Laat staan en serveer heet in steriele petrischalen. De uiteindelijke pH moet 6,9 ± 0,2 zijn.
-Laat stollen en bewaar in de koelkast tot gebruik. Voor het zaaien moeten de platen op kamertemperatuur zijn.
-Het poedervormige medium is groen van kleur en heeft een oranjebruine of roodgroene kleur, afhankelijk van de pH en het commerciële bedrijf. Een zeer bruine kleur geeft aan dat de agar oververhit was..
-Als de agar eenmaal is gestold, wordt het niet aanbevolen om opnieuw te gieten, omdat het medium verslechtert..
Dit medium wordt gebruikt om onder meer in ontlastingsmonsters en zuivelproducten te zoeken naar stammen van het geslacht Salmonella..
Omdat het een nogal onherbergzame omgeving is, is het raadzaam om overvloedig inoculum te zaaien als het directe monster wordt gebruikt. Anders moet een voorverrijking en verrijking van de specimens worden gedaan voordat ze in dit medium worden gezaaid..
Aangezien sommige Salmonella-stammen worden geremd of moeilijk groeien, wordt aanbevolen om dit medium te combineren met andere selectieve agar voor Salmonella..
Elke kolonie met een typisch Salmonella-kenmerk moet voor definitieve identificatie aan biochemische tests worden onderworpen..
Om de goede prestaties van het heldergroene agarmedium te testen, kunnen ATCC-stammen worden gebruikt om hun ontwikkeling erop te observeren..
De meest voorkomende soorten die worden gebruikt voor kwaliteitscontrole zijn: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922, Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.
De eerste 3 zouden roze of doorzichtige witte kolonies op een rode achtergrond moeten geven. Salmonella met een goede ontwikkeling en Proteus met een slechte of regelmatige groei.
Voor Klebsiella en Escherichia worden groenachtig gele kolonies met een gele achtergrond verwacht en in het geval van Shigella en Staphylococcus moeten ze worden geremd.
Het gedehydrateerde medium moet worden bewaard bij kamertemperatuur, op een droge plaats, omdat het medium erg hygroscopisch is.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.