De BHI-agar Brain Heart Infusion Agar is een solide, voedzaam kweekmedium. In het Spaans noemen we het hersenhartinfusie-agar. Het is een niet-selectief kweekmedium, wat betekent dat alle soorten grampositieve en gramnegatieve bacteriën kunnen ontstaan, evenals sommige gist- en draadschimmels..
Het is samengesteld uit een infusie van runderhersenen en -hart, peptisch hydrolysaat uit dierlijke weefsels, pancreashydrolysaat van caseïne, natriumchloride, glucose, dinatriumfosfaat en agar..
Opgemerkt moet worden dat BHI-agar een van de meest gebruikte kweekmedia is in bacteriologische laboratoria. Kan zonder supplementen worden gebruikt als primaire cultuur, subcultuur van kolonies verkregen op andere selectieve media of voor instandhouding van stammen in het laboratorium.
Anderzijds is het een ideaal medium om als basis te gebruiken bij de bereiding van verrijkte media, zoals bloedagar en chocoladeagar. Beide ideaal voor het isoleren van veeleisende micro-organismen vanuit voedingsoogpunt. Er moet echter worden opgemerkt dat het, aangezien het glucose bevat, niet geschikt is voor het waarnemen van hemolysepatronen..
Evenzo kan BHI-agar worden gebruikt voor de bereiding van speciale media voor het isoleren van moeilijk te kweken pathogene micro-organismen in gewone media, waaronder: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae en Histoplasma capsulatum.
Met het antibioticumadditief wordt BHI-agar een selectief medium voor de isolatie van schimmels.
Artikel index
Het is een voedzaam kweekmedium om matig veeleisende micro-organismen te isoleren, en de verrijking ervan kan worden verhoogd door toevoeging van bloed en andere voedingssupplementen..
Het is een niet-selectief kweekmedium en daarom kunnen de meeste grampositieve en gramnegatieve bacteriën en sommige schimmels groeien. Het kan echter selectief worden door de toevoeging van antibiotica..
Het medium bevat infusie van runderhersenen en -hart, peptisch hydrolysaat van dierlijk weefsel en alvleeskliercaseïnehydrolysaat; al deze verbindingen werken als bronnen van vitamines, aminozuren, stikstof en koolstof.
Glucose is een koolhydraat dat energie levert aan micro-organismen nadat ze het hebben gefermenteerd. Ondertussen handhaven natriumchloride en dinatriumfosfaat het osmotische evenwicht en zorgen voor een pH die bijna neutraal is. Ten slotte geeft de agar de vaste consistentie aan het medium.
Weeg 52 gram van het gedehydrateerde medium af en los het op in een liter gedestilleerd water. Breng het mengsel op een warmtebron tot het kookt, onder regelmatig roeren tijdens het oplossingsproces..
BHI-agarplaten of -wiggen kunnen zonder toevoegingen worden bereid.
Serveer de bereiding voor de bereiding van wiggen tot de helft van elke buis gevuld is, dek af en steriliseer gedurende 15 minuten in een autoclaaf bij 121 ° C, leg ze op een ondergrond totdat ze stollen. Later tot gebruik in de koelkast bewaren.
Het opgeloste mengsel wordt gedurende 15 minuten geautoclaveerd bij 121 ° C, laat het afkoelen tot 50 ° C en 20 ml van het medium wordt geserveerd in steriele petrischalen. Ze mogen stollen, worden omgekeerd en tot gebruik in de koelkast bewaard. Laat de platen op kamertemperatuur komen voordat u gaat zaaien.
De pH van het medium moet op 7,4 ± 0,2 blijven.
Onbereid medium is beige van kleur en voorbereid is licht amberkleurig.
Na het steriliseren van het medium, koel af tot een temperatuur van ongeveer 45 tot 50 ° C, voeg dan het bloed (50 ml) toe, meng voorzichtig om te homogeniseren en serveer aseptisch 20 ml in elke petrischaal. Als er zich bellen op de plaat vormen, moet de aanstekervlam snel over de bellen worden geleid om ze te verwijderen.
Evenzo kunnen speciale media worden bereid door de overeenkomstige additieven toe te voegen wanneer het mengsel een temperatuur van 45 tot 50 ° C bereikt..
Het midden is kersenrood.
BHI-agar zonder toevoegingen is nuttig als primaire kweek en voor het zaaien van zuivere stammen van weinig of gemiddeld veeleisende micro-organismen voor hun latere identificatie..
Omdat het een lichtgekleurd medium is, is het ideaal voor het observeren van pigmenten en omdat het geen storende stoffen bevat, kunnen er biochemische tests op worden uitgevoerd, zoals oxidase en catalase, of kunnen andere biochemische tests worden uitgevoerd vanuit kolonies. van deze agar.
Evenzo worden BHI-agarwiggen veel gebruikt voor het behoud van stammen gedurende een bepaalde tijd in het laboratorium (bacterioteca).
De aan het oppervlak gezaaide platen of wiggen met bacteriestammen worden 24 tot 48 uur bij 37 ° C geïncubeerd. Terwijl bij schimmels de temperatuur en incubatietijd afhangen van het type schimmel dat wordt gezocht..
Met deze basis kunt u verrijkte en selectieve media bereiden.
De belangrijkste functie is om als basis te dienen bij de bereiding van bloedagar voor routinematig gebruik in microbiologische laboratoria. Vooral de BHI-basis is bevorderlijk voor de isolatie van stammen van Streptococcus sp. Het heeft echter het nadeel dat het niet geschikt is voor het waarnemen van hemolysepatronen omdat het glucose bevat..
Het wordt ook gebruikt bij de bereiding van konijnen- of paardenbloedagar voor de isolatie van Haemophilus sp. Voor betere resultaten kan een verrijkingssupplement (IsoVitaleX) worden toegevoegd.
Als de monsters van de luchtwegen naar de agar komen, kan bacitracine worden toegevoegd om de bijbehorende flora te remmen en de kans op herstel van de stammen van Haemophilus sp.
Aan de andere kant kan bloedagar (lam of mens) met cystinetelluriet worden bereid om te isoleren Corynebacterium diphtheriae. Evenzo is het nuttig om konijnenbloedagar te bereiden, met de toevoeging van cystine en glucose voor het isoleren van Francisella tularensis.
De bloedagarplaten worden gezaaid door uitputting en ze worden 24-48 uur geïncubeerd bij 35-37 ° C in microaërofiliciteit (5-10% COtwee.
Dit medium kan met toevoeging van antibiotica de Sabouraud-agar vervangen voor het isoleren van schimmels..
De combinatie van BHI-agar met chlooramfenicol - gentamicine of penicilline -, streptomycine en paardenbloed is ideaal voor het isoleren van Histoplasma capsulatum.
Afhankelijk van het te isoleren micro-organisme wordt incubatie bij 35-37 ° C of bij kamertemperatuur bij aerobiose aanbevolen. Soms is incubatie nodig in beide temperatuurbereiken, hiervoor worden 2 platen gebruikt..
Sommige paddenstoelen houden van Trichophyton mentagrophytes moet maximaal 7 dagen bij kamertemperatuur worden geïncubeerd.
Van elke bereide batch wordt aanbevolen om 1 plaat of wig gedurende 24 uur bij 37 ° C te incuberen en te controleren of er geen groei is; vooral belangrijk bij het bereiden van bloedagar, omdat het een gemakkelijk besmet medium is.
Aan de andere kant kan de kwaliteit van het medium worden geëvalueerd door bekende of gecertificeerde standaardstammen te inoculeren en hun ontwikkeling te observeren..
In die zin, om BHI-agar zonder toevoegingen te evalueren, stammen van Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 of Candida albicans ATCC 10231. Incubeer 24 tot 48 uur bij 37 ° C in aerobiose. In alle gevallen wordt een bevredigende groei verwacht.
Om bloedagarplaten te evalueren, stammen van Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 of Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.
Bacteriestammen worden gedurende 24 uur bij 37 ° C in micro-aerofiliciteit geïncubeerd, terwijl de schimmel tot 7 dagen bij kamertemperatuur in een vochtige kamer wordt geïncubeerd. In alle gevallen wordt een bevredigende groei verwacht.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.