De middelgrote Stuart Het is een halfvaste agar of een bouillon zonder voedingsstoffen, die wordt gebruikt voor het transport van biologische monsters. Het doel is om de stammen die in het monster aanwezig zijn gedurende een bepaalde tijd levensvatbaar te houden, maar zonder de microbiële populatie te vergroten.
Het is gemaakt door Moffet, Young en Stuart in 1948 en later aangepast door Toshach en Patsula. Het is samengesteld uit natriumglycerofosfaat, natriumthioglycolaat, calciumchloride en agar-agar. Dit laatste is aanwezig in het halfvaste medium en afwezig in de vloeistof. Sommige laboratoria voegen methyleenblauw toe.
Ze worden meestal gebruikt wanneer het niet mogelijk is om het monster onmiddellijk te zaaien. In dit geval wordt het monster in het transportmedium geplaatst, terwijl het wordt overgebracht naar het laboratorium dat de kweek zal verwerken..
Op deze manier wordt gegarandeerd dat de aanwezige micro-organismen in leven blijven totdat ze in de overeenkomstige kweekmedia worden geïnoculeerd..
Aanvankelijk was het gebruik bedoeld om urethrale of vaginale monsters te transporteren waar de aanwezigheid van Neisseria gonorrhoeae. Later realiseerden ze zich dat het nut ervan breder zou kunnen zijn.
Het Stuart-medium bleek zeer efficiënt te zijn in het conserveren van labiele en veeleisende micro-organismen zoals Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis, onder andere. Naast andere niet-hinderlijke micro-organismen zoals enterobacteriën.
Het Stuart-medium vermijdt in feite de uitdroging van het monster, handhaaft het osmotische evenwicht en houdt de micro-organismen op een ideale pH. Anderzijds bevat dit medium strategisch geen voedingsstoffen, waardoor wordt voorkomen dat micro-organismen zich vermenigvuldigen.
Er zijn speciale monstertransportapparaten op de markt die dit of een ander vervoermiddel bevatten, de zogenaamde culturette. Ze kunnen ook in het laboratorium worden bereid.
Artikel index
Het doel van het vervoermiddel van Stuart is om de monsters zo dicht mogelijk bij hun oorspronkelijke staat te houden, totdat ze worden verwerkt..
Natriumglycerofosfaat en calciumchloride is een buffersysteem dat werkt door de pH en osmolariteit te behouden..
Ondertussen werkt natriumthioglycolaat als een reductiemiddel en in het geval dat het agar bevat, geeft dit het een halfvaste consistentie om de oxygenatie van het medium te vertragen. Ten slotte is methyleenblauw een oxidatie-indicator, dat wil zeggen dat het de aanwezigheid van zuurstof detecteert.
Het halfvaste medium met redoxindicator is ideaal voor het transporteren van monsters waarbij de aanwezigheid van anaërobe bacteriën wordt vermoed.
Het Stuart-medium voldoet, net als alle transportmiddelen, aan bepaalde kenmerken, waaronder:
-Behoudt levensvatbare microbiële stammen die aanwezig zijn zonder zich te vermenigvuldigen.
-Bevat geen voedingsstoffen; De verbindingen zijn bedoeld om het monster gehydrateerd te houden, onder adequate condities van pH en osmolariteit.
-Remt het autolyzaat van enkele delicate micro-organismen, zoals Pneumococcus.
-Het gebruik is tijdelijk, het mag niet te lang worden verlengd.
Natriumglycerofosfaat 10 gr
Natriumthioglycollaat 1,0 gr
Calciumchloride 0,1 gr
Methyleenblauw 0,002 gr
Agar-agar 3 gr
Gedestilleerd water 1 L
Meng de componenten en verwarm tot ze volledig zijn opgelost. Giet in buizen of speciale wattenstaafjes. Ze worden in de autoclaaf gebracht en 15 minuten gesteriliseerd bij 121 ° C. Laat de buisjes rechtopstaand afkoelen (in de vorm van een plug). Bij kamertemperatuur bewaren.
Weeg 14,1 g van het medium af in 1 liter gedestilleerd water. Verwarm regelmatig roeren tot het volledig is opgelost, het kan worden gekookt. De rest van de procedure zoals al beschreven.
Het gedehydrateerde medium is crèmekleurig en moet op het oppervlak blauw zijn. Dit komt door de aanwezigheid van methyleenblauw.
De pH van het medium moet worden ingesteld op 7,4 ± 0,2
Ingrediënten
Natriumglycerofosfaat 10 gr
Natriumthioglycollaat 1 gr
Calciumchloride dihydraat 0,1 gr
Gedestilleerd water 1000 ml
Het heeft dezelfde ingrediënten als de halfvaste stof, maar het heeft geen agar of methyleenblauw. In dit geval worden de componenten gemengd zonder verwarming en wordt 0,5 ml verdeeld in buisjes van 16 x 125 mm met schroefdoppen..
Het wordt gedurende 10 minuten gesteriliseerd in een autoclaaf bij 121 ° C. Voor bemonstering moeten dacron-wattenstaafjes worden gebruikt als het monster voor PCR is of rayon als het voor kweek is.
Buisjes worden bij kamertemperatuur bewaard.
Commercieel zijn er speciale transportmiddelen voor monsters, culturette genaamd; Dit apparaat is een langwerpige en dunne buis met een wattenstaafje aan de binnenkant en aan het einde is er een segment dat het halfvaste of vloeibare Stuart-medium bevat.
Het apparaat wordt geopend en het monster wordt genomen met het wattenstaafje. Het wordt dan terug in de buis gebracht totdat de punt van het wattenstaafje in het halfvaste transportmedium wordt gestoken; sommigen nemen een polyurethaanspons mee die is geïmpregneerd met vloeibaar Stuart-medium, waarmee het monster wordt geconserveerd door het nat te houden.
In het geval dat de aanwezigheid van delicate micro-organismen wordt vermoed, moeten wattenstaafjes met houtskool worden gebruikt om het monster te verzamelen..
De monsters die met wattenstaafjes of wattenstaafjes kunnen worden genomen en in dit medium kunnen worden overgebracht, zijn faryngeale exsudaten, rectale wattenstaafjes en verschillende afscheidingen, waaronder: vaginaal, urethraal, wond, oog, oor en abces..
Bij het overbrengen van het monster in het transportmedium naar het laboratorium moet voorkomen worden dat het medium wordt blootgesteld aan extreme omgevingsomstandigheden (te koud of te warm). Plotselinge veranderingen in atmosferische druk moeten ook worden vermeden.
De tijd waarin het medium in staat is om een micro-organisme levensvatbaar te houden, zal afhangen van de betreffende stam. Voor micro-organismen van het geslacht Neisserias en Haemophilus kunnen ze bijvoorbeeld tot 24 uur levensvatbaar blijven, maar stammen zoals Salmonella of Shigella kunnen dagen en zelfs weken duren..
Als geschat wordt dat de verwerking van het monster meer dan 4 dagen kan duren, verdient het de voorkeur het monster bij -70 ° C in te vriezen.
Het voorbereide vervoermiddel of de commerciële culturette moeten een label hebben waarop de volgende informatie wordt geplaatst:
Voor- en achternaam van de patiënt: vermijd steekproefverwarring.
Identificatie Nummer: het is handig om een bestelling op het werk te bewaren.
Bron van monsterverzameling: helpt de bacterioloog bij het kiezen van de juiste voedingsbodems.
Behandelend arts: Soms is het nodig voor eventuele consulten.
Datum en tijdstip van monsterneming: Het is noodzakelijk voor de acceptatie of afwijzing van het monster in overeenstemming met de tijd die is verstreken tussen het nemen van het monster en het ontvangen in het laboratorium..
Andere informatie die erg handig zou zijn om bij te voegen, is:
De vermoedelijke diagnose: gidsen bij de toevoeging van speciale kweekmedia volgens de diagnostische verdenking.
Antibiotische behandeling: het is handig om op het antibiogram te worden bevestigd.
Al deze informatie is essentieel om een goede verwerking van het monster te garanderen..
Om de prestaties van het Stuart-medium te evalueren, kunnen bekende stammen worden geïnoculeerd en bewaard bij 25 ° C, zoals: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
In alle gevallen wordt verwacht dat het het micro-organisme in kwestie herstelt, dat gedurende 24 uur wordt bewaard..
Aan de andere kant kunnen andere soorten worden gebruikt, zoals: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 en Escherichia coli ATCC 11775.
In alle gevallen wordt overvloedig herstel tot 96 uur verwacht..
Sommige onderzoeken verzekeren dat het glycerofosfaat dat aanwezig is in het Stuart-medium kan worden gemetaboliseerd door sommige coliformen, naast andere gramnegatieve bacteriën, en zich daarom in dit medium kan vermenigvuldigen..
Dit risico neemt toe naarmate de monsterverwerking langer wordt vertraagd. Evenzo beïnvloedt de blootstelling van het Stuart-medium aan hoge temperaturen tijdens de overdracht dit specifieke.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.