De Salmonella-Shigella-agar ook bekend als SS-agar, het is een matig selectief en differentieel medium, speciaal ontworpen voor de isolatie van enteropathogene bacteriën van de genera Salmonella en Shigella, zowel uit omgevings- als klinische monsters..
SS-agar heeft een complexe samenstelling; Het bestaat uit vleesextract, pepton, lactose, galzouten, natriumcitraat, natriumthiosulfaat, ijzercitraat, agar, neutraal rood, heldergroen en gedestilleerd water. Gezien de grote selectiviteit kunnen monsters met een overvloedige mengflora worden gezaaid..
In microbiologische laboratoria wordt het Salmonella-Shigella-medium veel gebruikt om de aanwezigheid van Salmonella en Shigella in diarree-ontlastingsmonsters, afvalwater, drinkwater en voedsel te onderzoeken..
Soms is het nodig om voorverrijkingsbouillon (lactosebouillon) en verrijkingsbouillon (selenietcystinebouillon) te gebruiken om Salmonella-stammen te herstellen.
Deze stappen zijn vereist wanneer het bestaan van salmonella in een zeer kleine hoeveelheid wordt vermoed, of wanneer de stam kan worden misbruikt door industriële productieprocessen, voornamelijk bewerkte voedingsmiddelen. Het is ook raadzaam om ontlastingsmonsters te verrijken van patiënten die met antibiotica zijn behandeld..
Vervolgens kan de verrijkte bouillon worden gezaaid op Salmonella-Shigella-agar en andere soortgelijke media, zoals xylose-agar, lysinedeoxycholaat (XLD) en enterische Hektoen-agar (HE)..
Artikel index
Elke component van het Salmonella-Shigella-kweekmedium heeft een specifieke functie en het mengsel als geheel geeft het de eigenschappen die het kenmerkend zijn..
Het vleesextract en pepton (verteerd met caseïne en dierlijk weefsel) leveren de benodigde voedingsstoffen (stikstof, koolstof en vitamines) voor de ontwikkeling van micro-organismen die de rest van de componenten kunnen verdragen..
De agar-agar zorgt voor de vaste consistentie van het medium.
Dit medium is zeer selectief omdat het galzouten, natriumcitraat en heldergroen bevat. Daarom remt het de groei van alle grampositieve bacteriën en de meeste gramnegatieve bacillen, waaronder enkele coliformen..
Terwijl bacteriën van het geslacht Salmonella en sommige stammen van Shigella deze verbindingen wel ondersteunen.
Het salmonella-geslacht is voornamelijk zeer resistent tegen galzouten, zozeer zelfs dat ze in de galblaas kunnen leven van sommige dragerpatiënten die constant de bacteriën in hun ontlasting afscheiden..
Lactose is het fermenteerbare koolhydraat dat helpt om lactose-fermenterende stammen te onderscheiden van niet-fermenterende stammen. Deze eigenschap blijkt uit de aanwezigheid van de pH-indicator, die in dit medium fenolrood is.
Lactose-fermenterende soorten geven rode kolonies, terwijl niet-fermenterende soorten kleurloos zijn. Deze eigenschap is belangrijk, omdat Salmonella en Shigella lactose niet fermenteren..
Aan de andere kant bevat dit medium natriumthiosulfaat als een bron van sulfide en ijzercitraat als een bron van ijzer. Beide verbindingen zijn in staat bacteriën te onderscheiden die waterstofsulfide kunnen produceren. Deze reageren om een zichtbaar, onoplosbaar zwart ijzersulfideprecipitaat te vormen..
Deze eigenschap wordt aangetroffen in sommige stammen van het geslacht Salmonella. Normaal gesproken zijn hun kolonies plat, kleurloos met een zwarte stip in het midden ervan. De rest van de salmonella's produceert geen H.tweeS en ontwikkelen zich als kleurloze kolonies.
Aan de andere kant zijn kolonies van het geslacht Shigella plat, kleurloos zonder zwart te worden..
Dit medium is heel eenvoudig te bereiden.
Weeg 63 g van het gedehydrateerde commerciële medium af en los op in een liter gedestilleerd water. Verhit de oplossing en roer. Het mengsel kan tot minuten koken.
Dit medium mag niet worden geautoclaveerd. Na oplossen wordt het direct op enkele of dubbele steriele borden geserveerd..
Als ze stollen, worden ze omgekeerd in plaquers gerangschikt en tot gebruik in de koelkast (2-8 ° C) bewaard..
Het medium na bereiding dient een pH van 7,2 ± 0,2 te hebben en een oranjerode kleur te hebben..
Het is belangrijk om de platen te laten opwarmen voordat u de monsters zaait. Het originele monster kan direct worden gezaaid, waarbij materiaal op een deel van de agar wordt geloosd en van daaruit door uitputting wordt weggesmeerd.
Als u verrijkte bouillon gebruikt, pas dan een deel van de selenietbouillon toe en zaai met een drigalski-spatel.
Incubeer 24 uur bij 37 ° C in aerobiose.
Er moet rekening mee worden gehouden dat het aantal te wegen grammen en de uiteindelijke pH van het medium kan variëren van het ene handelshuis tot het andere. De middelste basis brengt altijd de indicaties voor de bereiding.
Het wordt vaak gebruikt bij de analyse van de ontlastingcultuur en bij de microbiologische studie van afvalwater, drinkwater en voedselmonsters..
Regelmatig worden dubbele platen bereid, aan de ene kant wordt salmonella-shigella-agar geplaatst en aan de andere kant XLD-agar.
-Sommige Shigella-soorten groeien niet op dit medium. Daarom wordt het niet aanbevolen voor primaire isolatie van dit geslacht..
-Niet elke transparante kolonie met een zwart hart duidt op Salmonella; Biochemische tests moeten worden uitgevoerd om een correcte identificatie te maken, aangezien de kolonies van sommige Proteus-stammen niet te onderscheiden zijn van die van Salmonella.
-Het gedehydrateerde medium moet worden beschermd tegen blootstelling aan de omgeving, aangezien het erg hygroscopisch is. Daarom moet het in een droge en goed gesloten omgeving worden bewaard. Open voor zeer korte periodes.
-Na verloop van tijd kunnen de galzouten in het medium neerslaan en een matachtig beeld vormen in de agar, maar dit heeft geen invloed op de resultaten..
-Sommige Shigella-soorten kunnen lactose langzaam fermenteren.
Om te bewijzen dat het medium correct werkt, is het raadzaam om bekende of gecertificeerde controlestammen te planten en te observeren of de groei voldoet aan de verwachte kenmerken..
Hiervoor kun je stammen van gebruiken E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium of Enterococcus faecalis.
De verwachte resultaten zijn:
Escherichia coli --roze bolle kolonies.
Enterobacter en Klebsiella- grote kolonies en rode of roze slijmvliezen.
Shigella flexneri --heldere of kleurloze platte kolonies.
Salmonella typhimurium - kleurloze kolonies met zwart centrum.
Enterococcus faecalis-- totale remming.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.