De XLD-agar of Xylose Lysine Deoxycholaat Agar is een selectief en differentieel vast kweekmedium voor de isolatie van enteropathogenen. Taylor ontwierp de XL-agarformule (Xylose, Lysine) om de isolatie van het geslacht Shigella te verbeteren.
Hij merkte op dat dit geslacht werd geremd in de meeste media die bedoeld zijn voor de isolatie van enteropathogenen. Vervolgens werden natriumdeoxycholaat, natriumthiosulfaat en ferri-ammoniumcitraat toegevoegd om de selectiviteit ervan te verhogen. Deze formule is nuttig gebleken voor zowel de isolatie van Shigella als Salmonella.
XLD-agar is samengesteld uit gistextract, natriumdeoxycholaat, xylose, lysine, lactose, sucrose, natriumthiosulfaat, ijzerammoniumcitraat, natriumchloride, fenolrood en agar. In de meeste bacteriologische laboratoria worden duo XLD-agar en SS-agar gebruikt om fecale monsters voor Shigella en Salmonella te bestuderen..
Andere laboratoria geven de voorkeur aan de combinatie van CHROMagar Salmonella en XLD-agar, naast andere beschikbare opties. Deze duo's kunnen worden bereid in dubbele petrischalen. Aan de ene kant plaatsen ze XLD-agar en aan de andere kant het andere gekozen medium.
Artikel index
XLD-agar heeft gistextract, dat dient als een bron van voedingsstoffen voor de micro-organismen die zich op deze agar ontwikkelen. Bovendien levert de aanwezigheid van koolhydraten (xylose, sucrose en lactose) energie aan de bacteriën die ze kunnen fermenteren.
Als remmende stof heeft het natriumdeoxycholaat; Dit voorkomt de groei van Gram-positieve bacteriën, waardoor het medium selectief wordt.
Zoals eerder vermeld, bevat XLD-agar xylose; Dit koolhydraat wordt gefermenteerd door alle bacteriën die in dit medium groeien, behalve het geslacht Shigella..
Dit is een van de kenmerken die het zijn differentiële karakter geven, aangezien de Shigella-kolonies zich van de rest onderscheiden door rode kolonies te ontwikkelen, terwijl de andere bacteriën gele kolonies produceren..
Het geslacht Salmonella fermenteert ook xylose en genereert aanvankelijk gele kolonies. Echter, nadat het koolhydraat xylose is uitgeput, valt het lysine aan vanwege zijn enzym lysine decarboxylase. Decarboxylering van lysine genereert basen die de kleur van de kolonie en het omringende medium veranderen in het oorspronkelijke rood.
Dit gedrag wordt alleen uitgevoerd door Salmonella, aangezien de coliformen die lysine decarboxyleren niet in staat zijn om het medium alkalisch te maken. Dit komt omdat coliformen ook de aanwezige lactose en sucrose fermenteren; daarom is de productie van zuren erg hoog, waardoor de gele kolonie in deze bacteriën blijft.
Opgemerkt moet worden dat het geslacht Salmonella geen sucrose of lactose fermenteert.
XLD-agar maakt ook de detectie mogelijk van Salmonella-soorten die H producerentweeS; Hiervoor heeft het de zwavelbron die wordt vertegenwoordigd door natriumthiosulfaat en een reactieontwikkelaar die ijzerammoniumcitraat is..
De laatste reageert met de HtweeS (kleurloos gas) en vormt een onoplosbaar zichtbaar zwart neerslag van ijzersulfaat. In die zin zullen de kenmerken van de salmonella-kolonies rood zijn met een zwart centrum..
Opgemerkt moet worden dat voor de vormingsreactie van HtweeJa, een alkalische pH is nodig. Dat is de reden waarom andere Enterobacteriaceae die H vormentweeS ze kunnen het niet of ze doen het slecht in dit medium, omdat de hoge zuurgraad die ze produceren bij het vergisten van de aanwezige koolhydraten de reactie afremmen of belemmeren.
Ten slotte handhaaft natriumchloride het osmotische evenwicht; agar is het stollingsmiddel en fenolrood detecteert veranderingen in pH, waardoor de kleur van de kolonies en het medium verandert.
Weeg 55 g gedehydrateerd XLD-medium af en los op in 1 liter water. Verhit en roer het mengsel tot het kookpunt bereikt. Oververhit niet, aangezien hitte het medium beschadigt en een neerslag creëert dat de morfologie van typische kolonies verandert.
Dit medium mag niet worden geautoclaveerd. Bij het oplossen moet het naar een waterbad van 50 ° C worden geleid. Bij afkoeling direct op steriele petrischalen serveren. Ze kunnen in enkele borden of dubbele borden worden gegoten. Ze worden gestold en tot gebruik in de koelkast bewaard..
Tempereer voor gebruik. Aangezien het een niet-steriel medium is, wordt aanbevolen om het vlak voor de datum van gebruik klaar te maken..
De uiteindelijke pH van het medium moet 7,4 ± 0,2 zijn. De kleur van het bereide medium is oranjerood, doorschijnend, zonder neerslag..
Als u Xylose Lysine (XL) -basisagar heeft, kunt u natriumdeoxycholaat, natriumthiosulfaat en ijzerammoniumcitraat toevoegen. Op deze manier wordt de XLD-agarformule verkregen.
XLD-agar wordt gebruikt voor het herstel van enteropathogenen, voornamelijk van het geslacht Shigella en secundair van het geslacht Salmonella. Het is handig voor het evalueren van ontlasting-, water- en voedselmonsters.
Ontlastingsmonsters kunnen rechtstreeks op XLD-agar worden gezaaid, waardoor het materiaal goed wordt verdeeld om geïsoleerde kolonies te verkrijgen.
Om het herstel van salmonella te verbeteren, kan XLD-agar worden gezaaid uit Salmonella-verrijkingsmedia..
In het geval van voedsel kunnen verrijkingsbouillon voor Salmonella en Shigella worden gebruikt. Voor salmonella kun je onder andere selenietcystinebouillon, felgroene tetrathionaatbouillon gebruiken..
In het geval van Shigella kan het worden verrijkt met Shigella-bouillon met 0,5 µ / ml novobiocine, geïncubeerd bij 42 ° ± 1 ° C gedurende 16-20 uur.
Bij wateranalyse wordt onder meer de membraanfiltratietechniek en het gebruik van XLD-agar aanbevolen..
Het geënte medium wordt aëroob geïncubeerd bij 35 ° C gedurende 24 tot 48 uur..
De typische kolonies van elk geslacht worden waargenomen, de verdachte kolonies moeten biochemische tests ondergaan voor hun identificatie.
De volgende bacteriestammen kunnen worden gebruikt om de kwaliteitscontrole van het medium te evalueren: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella abony DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.
Het geslacht Salmonella wordt gekenmerkt door het presenteren in dit medium rode kolonies met een zwart centrum of volledig zwarte kolonies. Terwijl in het geslacht Shigella de kolonies rood moeten zijn, dat wil zeggen de kleur van het medium.
In het geval van Escherichia coli het wordt verwacht geheel of gedeeltelijk geremd te zijn; als het groeit, zijn de kolonies geel. Om zo te Proteus mirabilis een slechte groei wordt verwacht met roze kolonies met of zonder een zwart centrum. Uiteindelijk zal het geslacht Klebsiella groeien als gele kolonies.
XLD-agar wordt veel gebruikt in bacteriologische laboratoria vanwege zijn hoge efficiëntie voor het herstel van Shigella en heeft ook een goed herstel van het Salmonella-geslacht.
Rall et al. (2005) toonden in hun werk getiteld `` Evaluation of three enrichment bouillon and five solid media for the detection of Salmonella in pluimvee '' aan dat van de drie geteste klassieke media (heldergroene agar, SS-agar en XLD-agar), XLD agar had het beste herstelpercentage.
De herstelpercentages waren als volgt: 13,8% voor heldergroene agar, 27,6% voor SS en 34,5% voor XLD. Het werd alleen overtroffen door de chromogene media Rambach-agar met 48% herstel en de CHROMagar met 79,3%.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.