Antistreptolysine O-kwantificering, grondgedachte, techniek, pathologieën

4193
Charles McCarthy

De antistreptolysine O is het antilichaam dat wordt gegenereerd als reactie op een infectie veroorzaakt door de bacterie Streptococcus pyogenes of ook bekend als bèta-hemolytische streptococcus van groep A. Dit produceert twee soorten exotoxinen met hemolytische activiteit genaamd "S" en "O" streptolysinen..

Streptolysine S is verantwoordelijk voor de bèta-hemolyse die optreedt in bloedagar en, hoewel het giftig is voor bepaalde cellen van het immuunsysteem, is het niet antigeen. Terwijl streptolysine O, dat labiel is tegen zuurstof, verantwoordelijk is voor de hemolyse die optreedt onder de bloedagar en dit antigeen is.

Streptococcus pyogenes / Diagram van wat er gebeurt in de ASTO-test (agglutinatiereactie). (Antilichamen gebonden aan latexdeeltjes die het specifieke antigeen bevatten). Bron: Gebruiker: Graham Beards [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0))] / Alejandro Porto [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses / door-sa / 3.0)]

Daarom, wanneer de cellen van het immuunsysteem interageren met streptolysine O, wordt een specifieke immuunrespons geproduceerd, die de activering van B-lymfocyten genereert.Deze cellen produceren antilichamen gericht tegen streptolysine O. Daarom worden de antilichamen antistreptolysine O genoemd..

De Streptococcus pyogenes produceert verschillende pathologieën, waaronder: tonsillitis, erysipelas, impetigo, puerperale koorts, roodvonk en bloedvergiftiging. Antistreptolysine O-antilichamen verschijnen 8 tot 30 dagen na het begin van de infectie.

De meeste van deze infecties komen zeer vaak voor bij de bevolking, dus het is normaal dat mensen antistreptolysine O-antilichamen in hun bloed hebben. Lage titers duiden op een eerdere infectie met deze bacterie, maar een hoge of stijgende titer duidt op een recente of aanhoudende infectie..

Artikel index

  • 1 Kwantificering van antistreptolysine O-antilichamen
  • 2 Achtergrond van de ASTO-techniek
  • 3 technieken
    • 3.1 - Semi-kwantitatieve techniek
    • 3.2 - Kwantitatieve techniek
  • 4 Pathologieën met hoge titers van antistreptolysine O
    • 4.1 Post-streptokokken auto-immuunziekten
  • 5 referenties

Kwantificering van antistreptolysine O-antilichamen

In het laboratorium kan de antistreptolysine "O" -antilichaamtiter worden gemeten door middel van een serologische test. De antistreptolysine O (ASTO) -test is gebaseerd op een agglutinatiereactie met latex.

Het kan semi-kwantitatief worden gedaan, rapportage in kruisen of de titer kan ook worden gekwantificeerd. Het is normaal en niet significant om waarden tot 200 IU / ml of Todd-eenheden / ml te vinden. Boven deze waarde wordt het als positief beschouwd en is het klinisch significant..

Voor deze test hoeft de patiënt niet te vasten. Serum wordt als monster gebruikt, dat wil zeggen, het bloed van de patiënt wordt geëxtraheerd en in een buisje zonder antistollingsmiddel geplaatst, vervolgens wordt het gecentrifugeerd om het serum te verkrijgen.

ASTO Techniek Basis

De techniek gebruikt latexdeeltjes als ondersteuning om het streptolysine O-antigeen te fixeren De geabsorbeerde antigeendeeltjes reageren met het serum van de patiënt. Als de patiënt antistreptolysine O-antilichamen heeft, zullen deze zich binden aan het antigeen dat aan het latexdeeltje is gehecht.

Deze binding veroorzaakt agglutinatie die macroscopisch zichtbaar is. De intensiteit van de reactie is recht evenredig met de concentratie van aanwezige antilichamen.

Technieken

- Semi-kwantitatieve techniek

De intensiteit van de reactie kan semi-gekwantificeerd worden in kruisen. Om dit te doen, wordt een serologische reactieplaat genomen en geplaatst:

50 µl serum en 50 µl ASTO-reagens. Meng goed met een houten tandenstoker en plaats in een automatische mixer gedurende 2 minuten. Kijk maar. Als er geen automatische rotator beschikbaar is, moet dit handmatig worden gedaan.

Interpretatie

Forfaitaire ophanging (uniform): negatief

1. + = zwakke reactie

2. ++ = lichte reactie

3. +++ = matige reactie

4. ++++ = sterke reactie

Sera die positief zijn met 3 en 4 kruisen, kunnen worden gekwantificeerd.

- Kwantitatieve techniek

Voor de kwantificering van de titer worden seriële verdunningen 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16 gemaakt..

Om dit te doen, gaat u als volgt te werk: 4 reageerbuisjes of Kahn-buisjes worden genomen en 0,5 ml fysiologische zoutoplossing wordt op alle buizen geplaatst. Vervolgens wordt 0,5 ml patiëntenserum aan de eerste buis toegevoegd. Het mengt goed. Dat buisje komt overeen met de 1: 2 verdunning.

Vervolgens wordt 0,5 ml overgebracht naar buis 2 en goed gemengd. Deze buis komt overeen met de 1: 4 verdunning enzovoort, totdat de gewenste verdunning is bereikt.

Neem 50 µl van elke verdunning en reageer met 50 µl ASTO-reagens op een agglutinatieplaat, zoals uitgelegd in de semi-kwantitatieve techniek.

Interpretatie

Er wordt rekening gehouden met de hoogste verdunning waarbij zichtbare agglutinatie wordt waargenomen. De berekeningen worden als volgt uitgevoerd:

ASTO = Inverse van hoogste positieve verdunning x techniekgevoeligheid (constant).

Voorbeeld: patiënt met een positieve reactie tot 1: 8

ASTO = 8 x 200 IE / ml = 1600 IE / ml of Todd Eenheden / ml.

Referentiewaarde

Normale volwassene: tot 200 IE / ml

Normale kinderen: tot 400 IE / ml

aanbevelingen

Het is raadzaam om een ​​positieve en een negatieve controle bij de patiënten te monteren om er zeker van te zijn dat het reagens in optimale staat verkeert. Als de positieve controle niet agglutineert of de negatieve controle agglutineert, kan het reagens niet worden gebruikt..

De reactie moet na 2 minuten worden geïnterpreteerd, daarna is het niet meer geldig als er agglutinatie is. Het gaat over valse positieven.

Hyperlipemische sera verstoren de reactie. Ze kunnen valse positieven geven.

Een geïsoleerde ASTO-waarde helpt niet veel. Het moet gepaard gaan met de symptomen.

Daarnaast is het raadzaam om bij verdenking van reumatische koorts of post-streptokokkenglomerulonefritis minimaal 2 ASTO-metingen uit te voeren, dit om de verhoging van de antistreptolysine O-spiegels aan te tonen en zo de diagnose te bevestigen..

Pathologieën met hoge titers van antistreptolysine O

Antistoffen tegen streptolysine worden verhoogd na een infectie door Streptococcus pyogenes o Groep A ß-hemolytische Streptococcus.

Deze omvatten: acute faryngitis, roodvonk, impetigo, erysipelas, puerperale koorts en bloedvergiftiging.

Sommige patiënten die recente of terugkerende streptokokkeninfecties hebben gehad, kunnen auto-immuunziekten krijgen als gevolg of complicatie van post-streptokokkeninfectie, zoals acute glomerulonefritis en reumatische koorts..

Post-streptokokken auto-immuunziekten

Reumatische koorts

Het is een inflammatoire complicatie of restverschijnselen die 1 tot 5 weken na een streptokokkeninfectie kunnen optreden. Antistreptolysine O-titers stijgen significant 4 tot 5 weken na het begin van de ziekte.

Een hoge ASTO-titer begeleidt de diagnose, maar is niet gerelateerd aan de ernst van de ziekte, en de afname ervan impliceert geen verbetering.

Antistreptolysine O-antilichamen reageren kruislings op collageen en spiervezels en tasten bepaalde organen aan (onder andere hart, huid, gewrichten en zenuwstelsel).

Deze complicatie of gevolgen veroorzaakt hartaandoeningen, koorts, algemene malaise, niet-etterende migrerende polyartritis, chorea, enz..

Acute glomerulonefritis

Acute glomerulonefritis is een niet-etterend restverschijnsel dat optreedt als gevolg van de afzetting van antigeen-antilichaamcomplexen op het glomerulaire basaalmembraan.

De vorming en circulatie van antigeen-antilichaamcomplexen (ag-ac) gegenereerd door streptokokkeninfecties kan leiden tot exsudatieve veranderingen en ontsteking van de glomeruli, met proteïnurie en hematurie.

Deze ag-ac-complexen worden afgezet in de glomerulus en activeren de complementcascade, wat resulteert in glomerulaire endotheelschade. Daarom wordt het als een auto-immuunziekte beschouwd, omdat het immuunsysteem van het individu zijn eigen weefsels beschadigt..

Antistreptolysine O-antilichamen zijn erg hoog en de complementniveaus zijn laag.

Referenties

  1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Beschikbaar op: wiener-lab.com.ar
  2. Wikipedia-bijdragers. "Anti-streptolysine O." Wikipedia, de gratis encyclopedie. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23 januari 2019. Web. 19 juli 2019.
  3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S.Antistreptolysine O titer bij gezondheid en ziekte: niveaus en significantie. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Beschikbaar in: ncbi.nlm.nih
  4.  Sen E, Ramanan A. Hoe antistreptolysine O-titer te gebruiken. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Beschikbaar in: ncbi.nlm.nih
  5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Microbiologische diagnose. (5e ed.). Argentinië, Redactie Panamericana S.A.
  6. González M, González N. 2011. Handleiding medische microbiologie. 2e editie, Venezuela: Directoraat media en publicaties van de Universiteit van Carabobo.

Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.