De lactofenol blauw of katoenblauw is een preparaat met eenvoudige kleureigenschappen. Het wordt in klinische laboratoria gebruikt om voornamelijk schimmelstructuren zoals hyfen, kiembuizen en sporen te kleuren..
Het helpt bij de vermoedelijke of voorlopige diagnose van bepaalde schimmels, maar het is altijd raadzaam om de diagnose te versterken met specifiekere tests, zoals biochemische of serologische tests..
Lactofenolblauw bestaat uit melkzuur, anilineblauw, glycerine, fenol en gedeïoniseerd water. Het kan worden bereid in het laboratorium of het kan kant-en-klaar worden gekocht. Als het eenmaal is voorbereid, is het klaar om te worden gebruikt, het mag in geen geval worden verdund, omdat deze actie vreselijke resultaten zal opleveren.
De concentratie van zijn componenten maakt het ideaal voor het kleuren van schimmelstructuren, aangezien fenol de bijbehorende bacteriële microbiota elimineert, terwijl melkzuur een beschermende film rond de schimmelstructuur genereert. Ten slotte heeft anilineblauw een affiniteit om zich te hechten aan de structuren van de schimmel..
Artikel index
Met lactofenolblauw wordt een eenvoudige kleuring van de schimmelstructuren van een bepaalde mycologische cultuur uitgevoerd. Het wordt simpel genoemd omdat het maar één kleurstof gebruikt.
Lactofenolblauw werkt, behalve kleuring, ook als een klaringsmiddel van het monster, dankzij de gezamenlijke werking van melkzuur en fenol, bovendien gedraagt fenol zich als een bijtmiddel en voorkomt het tegelijkertijd de lysis van het micro-organisme door de hydrolyse te remmen. enzymen die aanwezig kunnen zijn.
Terwijl melkzuur de morfologie van de structuren van de schimmel behoudt.
Aan de andere kant heeft anilineblauw de eigenschap zich te hechten aan of te binden aan chitine-bevattende structuren. Structuren kleuren lichtblauw.
Opgemerkt moet worden dat de celwand van schimmelmicro-organismen, vooral schimmels, chitine bevat, en daarom is deze kleurstof ideaal voor het kleuren van deze micro-organismen..
Lactofenolblauw-oplossing is een licht troebele, licht troebele, waterige kleurstof, sterk zuur, lichtblauw van kleur. Het blijft stabiel als het wordt bewaard tussen 15 ° C en 25 ° C. De fles moet goed gesloten worden gehouden. Het is irriterend en bijtend voor de huid en slijmvliezen.
De formule om één liter lactofenolblauw te bereiden is als volgt:
-250 g / l melkzuur
-1,0 g / l anilineblauw of methylblauw
-500 g / L glycerine
-250 g / l fenol
-250 ml gedeïoniseerd of gedestilleerd water.
Het fenol wordt opgelost in het eerder verwarmde water. Melkzuur en glycerine worden toegevoegd en zeer goed gemengd. Ten slotte lost het anilineblauw op. Mengt opnieuw en is klaar voor gebruik.
De porties om 80 ml lactofenolblauw-oplossing te bereiden zijn:
-20 g fenolkristallen
-20 ml melkzuur
-40 ml glycerine of glycerol
-20 ml gedestilleerd water.
Het wordt gebruikt om schimmelstructuren te kleuren en, door de morfologische kenmerken waargenomen op microscopisch niveau, om een vermoedelijke diagnose van de schimmel te kunnen stellen..
- Er wordt een pure cultuur van de schimmel genomen waaruit u de structuren ervan wilt observeren.
- Het verdient de voorkeur om in een kap met laminaire stroming of onder de aansteker te werken met een masker en handschoenen, omdat het noodzakelijk is om te voldoen aan de normen voor bioveiligheid, omdat de meeste schimmels gemakkelijk in de omgeving kunnen worden verspreid en daarom een gevaar vormen voor de operator.
- Een druppel lactofenolblauw wordt op een glaasje geplaatst..
- Een klein vierkant plakband van goede kwaliteit wordt gesneden en zeer zorgvuldig op het uiteinde van het platina handvat geplakt, dat al gesteriliseerd en koud is..
- Het platina handvat wordt benaderd tot het meest oppervlakkige deel van de schimmelkolonie en de cultuur wordt heel voorzichtig aangeraakt, precies waar het plakband zit..
- Het wordt vervolgens naar het glaasje gebracht en net over de druppel lactofenolblauw geplaatst, waarbij ervoor wordt gezorgd dat de tape perfect wordt verlengd en gesmeerd met de kleurstof. De platina handgreep is zeer subtiel verwijderd.
- Een andere druppel lactofenolblauw wordt op de tape geplaatst en een dekglaasje erop. Oefen niet te veel druk uit om te voorkomen dat de structuren van de schimmel worden vernietigd, omdat deze extreem kwetsbaar zijn. De kleurstof moet ongeveer 3 tot 4 minuten inwerken.
- Na deze tijd is het preparaat klaar om onder een microscoop te worden bekeken met een vergroting van 10x of 40x. Als observatie bij 100X vereist is, gebruik dan immersieolie.
- De structuren van de schimmel zijn over het algemeen blauw gekleurd, met uitzondering van de dematiaceuze schimmels die hun kenmerkende bruine kleur van dit type schimmel behouden..
Als het nodig is om een direct biologisch monster te bestuderen, zoals sputum, pus, exsudaten, afscheidingen, onder andere, moeten deze een voorafgaande procedure hebben voor het decontamineren van het monster. Hiervoor wordt een NaOH-oplossing gebruikt.
In het geval van haarmonsters kunnen deze direct worden geverfd.
Meerdere aangetaste haren (10 in totaal) worden uit de vermoedelijke tinea capitis laesies (alopecische gebieden) gehaald en op een objectglaasje geplaatst (3 tot 4 haren per objectglaasje). Een paar druppels lactofenolblauw worden bovenop geplaatst en onmiddellijk bedekt met een dekglaasje..
Pak het objectglaasje met een pincet vast en verwarm het zachtjes boven een brander. Maak hiervoor 3 tot 4 snelle passages door de vlam. Bekijk de microscoop op 40X en zoek naar sporen buiten of binnen het haar (respectievelijk ectothrix of endothrix). Voeg indien nodig immersieolie toe en observeer bij 100X.
Na incubatie van de vermoedelijke cultuur van Candida albicans in menselijk serum gedurende 2 tot 4 uur bij 37 ° C, neem een deel van de oplossing en kleur met lactofenolblauw. De bereiding wordt onder de microscoop bij 40x bekeken. De kiembuis is aanwezig en de blastosporen kleuren helderblauw.
De National Fire Protection Association (NFPA) stelt het veiligheidsinformatieblad voor chemische stoffen vast in termen van het risico dat het vertegenwoordigt volgens verschillende aspecten, deze worden gesymboliseerd door een gekleurde ruit en een nummer van 0-4.
Gezondheidsrisico's worden aangegeven in blauw, ontvlambaarheid in rood, instabiliteit of reactiviteit in geel en elk speciaal gevaar in wit..
Het gezondheidsrisico van lactofenolblauw volgens de NFPA is niveau 3. Dit betekent dat de stof extreem gevaarlijk is bij inslikken of bij direct contact met huid of slijmvliezen..
Het is een sterk bijtende en irriterende stof.
Bij contact met huid en slijmvliezen veroorzaakt het ernstige brandwonden.
Als het wordt ingeslikt, kan het hoofdpijn, verwarring, lethargie, bewusteloosheid, ademhalingsstilstand en zelfs de dood veroorzaken..
Volgens de NFPA is Lactophenol Blue beoordeeld op niveau 1 voor ontvlambaarheid. Dit betekent dat het alleen brandt als het boven 94 ° C wordt verwarmd..
Vermeld onder de NFPA op niveau 0 (nul) voor reactiviteit. Dit betekent dat het geen risico op reactiviteit heeft, dat wil zeggen dat het een chemisch stabiele stof is..
Biedt geen extra speciale gevaren.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.