De chromatogram is een tweedimensionaal grafisch record, verkregen op een absorberend medium, en toont de scheiding van stoffen door middel van chromatografie. Een zichtbaar patroon, pieken of vlekken, vormt zich op het chromatogram en weerspiegelt de fysieke scheiding van de componenten van een mengsel.
Het onderste cijfer is een chromatogram met drie pieken, A, B en C, van drie componenten van het monster, gescheiden door chromatografie. Opgemerkt wordt dat elk van de drie pieken een verschillende hoogte en locatie heeft op de tijdas van het chromatogram..
De ordinaat- of Y-as registreert informatie over de intensiteit van het signaal (in dit geval in millivolt mV). Vertegenwoordigt het record, afhankelijk van de detector, van een of andere fysieke eigenschap van de stof of een afzonderlijk bestanddeel van het mengsel.
De hoogte van de piek is evenredig met de concentratie van de component die in een optimaal systeem van het monster is gescheiden. Zo is het bijvoorbeeld gemakkelijk te visualiseren dat component B in een hogere verhouding wordt aangetroffen dan A en C.
Op de abscis of X-as wordt de retentietijd van de componenten van het monster of mengsel weergegeven. Het is de tijd die verstrijkt vanaf de injectie van het monster totdat het stopt, en is verschillend voor elke zuivere stof.
Artikel index
Het is het laatste record van het hele chromatografieproces. Parameters die van analytisch belang zijn, worden eruit gehaald. Dit kan worden verkregen als een elektronisch bestand, een gedrukt histogram of op het procesmedium; op papier bijvoorbeeld.
De Y-as wordt gegenereerd door signaal- of intensiteitsresponsdetectoren, zoals spectrofotometers. Een optimale analyse van de tijd, van de karakteristieken van de bekomen pieken of vlekken is essentieel; de grootte, locatie, kleur, onder andere aspecten.
Chromatogramanalyses vereisen in het algemeen het gebruik van controles of standaarden, stoffen met bekende identiteit en concentratie. De analyse van deze controles maakt het mogelijk om door vergelijking met de karakteristieke monsters van de componenten van het onderzochte monster vast te stellen.
In het chromatogram kan worden waargenomen en geanalyseerd hoe de scheiding van de componenten van een mengsel werd uitgevoerd. De optimale studie maakt het mogelijk om een stof te identificeren, de zuiverheid ervan aan te tonen, de hoeveelheid stoffen in een mengsel te kwantificeren, naast andere aspecten.
De geëxtraheerde informatie kan kwalitatief zijn; bijvoorbeeld wanneer stoffen worden geïdentificeerd en hun zuiverheid wordt bepaald. Kwantitatieve informatie heeft betrekking op de bepaling van het aantal componenten in het mengsel en de concentratie van de afgescheiden analyt..
Door de resultaten van het chromatogram te analyseren, kunnen verschillende stoffen worden geïdentificeerd door de retentietijden te vergelijken met die van bekende stoffen. Waargenomen kan worden of de onderzochte stoffen dezelfde afstand afleggen als ze dezelfde tijd hebben als de bekende stoffen.
Het chromatogram kan bijvoorbeeld metabolieten van medicijnen zoals stimulantia en steroïden in de urine van atleten detecteren en identificeren. Het is een belangrijke ondersteuning bij de studie en het onderzoek van sommige metabolieten die worden geproduceerd door genetische aandoeningen bij pasgeborenen.
Het chromatogram maakt de detectie van onder meer in drinkwater aanwezige gehalogeneerde koolwaterstoffen mogelijk. Het is essentieel bij laboratoriumanalyses voor kwaliteitscontrole, omdat het de opsporing en identificatie van de aanwezige verontreinigingen in de verschillende producten mogelijk maakt.
In een chromatogram kun je onderscheid maken tussen zuivere en onzuivere stoffen. Een zuivere stof zou een enkele piek op het chromatogram produceren; terwijl een onzuivere substantie twee of meer pieken zou produceren.
Door de condities waarin de chromatografie wordt uitgevoerd goed aan te passen, kan worden voorkomen dat twee stoffen een enkele piek vormen..
Door het piekoppervlak van het chromatogram te analyseren, kan de concentratie van de monstercomponenten worden berekend.
Daarom is het oppervlak van de piek evenredig met de hoeveelheid van de stof die in het monster aanwezig is. Deze kwantitatieve gegevens worden verkregen in zeer gevoelige systemen, zoals bijvoorbeeld gegenereerd door gas- of vloeistofchromatografie.
Een van de classificaties van chromatogrammen hangt nauw samen met de verschillende soorten chromatografie, die het overeenkomstige chromatogram genereren.
Afhankelijk van de bedrijfsomstandigheden, onder andere de detectoren, zal het chromatogram variëren in inhoud en kwaliteit..
Het chromatogram kan rechtstreeks op papier of een dunne laag worden gegenereerd, waardoor de verdeling of verdeling van de componenten van het monster direct wordt weergegeven.
Het is erg handig voor het scheiden en bestuderen van gekleurde stoffen met natuurlijke pigmenten, zoals chlorofyl. Het kan worden onderworpen aan ontwikkelingsprocessen als de stoffen geen natuurlijke kleur hebben, en het is nuttig voor kwalitatief onderzoek.
Het chromatogram kan ook worden verkregen met behulp van een detector die het respons-, output- of eindsignaal van de chromatografie registreert. Zoals eerder vermeld, is deze detector meestal een spectrofotometer, een massaspectrometer, automatische sequencers, elektrochemicaliën, onder anderen..
Chromatogrammen die in kolommen worden gegenereerd, of het nu gaat om gassen of vloeistoffen, evenals die met een hoge resolutie in dunne lagen, gebruiken detectoren.
Afhankelijk van het type detector kan het chromatogram worden geclassificeerd in differentieel of integraal, afhankelijk van de responsvorm van de detector..
Een differentiële detector meet continu het reactiesignaal van het chromatogram, terwijl integrale detectoren cumulatief het corresponderende signaal meten.
Een differentieel chromatogram is een chromatogram dat wordt verkregen door een differentiële detector. Deze detectoren omvatten bijvoorbeeld spectrofotometers en detectoren van veranderingen in elektrische geleidbaarheid..
Dit type chromatogram heeft het resultaat aangetoond van de scheiding van anionen uit een monster, gedetecteerd door indirecte fotometrie. Dezelfde resultaten zijn ook verkregen voor de studie van ionen, bijvoorbeeld met uiteindelijke detectie door conductimetrie..
De bovenste grafiek toont het voorbeeld van een differentieel chromatogram, verkregen door automatische DNA (deoxyribonucleïnezuur) sequencers. De grafiek toont duidelijk pieken van vier kleuren, één kleur voor elk van de stikstofbasen in DNA..
Door de ondersteuning van een geautomatiseerd programma wordt de interpretatie van de sequentie van de basen van het geanalyseerde DNA vergemakkelijkt, evenals voor meer complexe analyten.
Het integrale chromatogram komt overeen met dat verkregen door een integrale detector. Dit chromatogram toont de output van een enkel onderdeel dat wordt bestudeerd. Meerdere pieken worden niet verkregen zoals in het differentieel.
In het integrale chromatogram wordt een record verkregen met een vorm die als een stap wordt beschreven. Deze vorm is het deel van het chromatogram dat overeenkomt met de hoeveelheid van een enkele stof die de kolom verlaat..
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.