De Faust-techniek Het is een methode die de concentratie van sommige parasieteneieren en / of larven in de ontlasting mogelijk maakt door middel van flotatie. Het wordt gebruikt wanneer directe ontlastingstests negatief zijn of wanneer u schone monsters zonder afval wilt verkrijgen.
Concentratiemethoden voor coproparasitologische onderzoeken zijn van drie soorten: door flotatie, door sedimentatie of door methoden die de twee voorgaande combineren. Deze methoden vergroten de kans op positieve resultaten.
De Faust-methode bestaat uit het mengen van een deel van het ontlastingsmonster met een stof die dichter is dan de te concentreren eieren of parasieten. Dit zorgt ervoor dat ze, omdat ze minder dicht zijn, op het oppervlak drijven. De bovenstaande vloeistof wordt verzameld en onder een microscoop bekeken voor identificatie en kwantificering..
Deze methode wordt gebruikt om wormeieren te visualiseren. Het is op zijn beurt een zeer gevoelige methode gebleken voor de diagnose van Giardia lamblia, een flagellated protozoa wijd verspreid over de hele wereld. Flotatiemethoden worden niet aanbevolen voor zeer zware parasieteneieren zoals lintwormen en trematoden..
Parasieten zijn wereldwijd een van de meest voorkomende darminfecties, vooral in arme landen met slechte hygiënische maatregelen. Om deze reden is het hebben van gevoelige methoden die de identificatie en kwantificering van deze parasieten mogelijk maken, erg nuttig voor diagnose en behandeling..
Artikel index
De techniek is gebaseerd op het bestaan van het verschillende soortelijk gewicht van eieren, parasieten, cysten, larven en afval, waarbij zinksulfaatoplossingen als flotatiemethode worden gebruikt..
De grondgedachte voor de techniek is om het monster te mengen met een zinksulfaatoplossing die een hogere dichtheid heeft dan lichtere eieren, larven of parasieten..
Hierdoor kunnen de zwaarste elementen neerslaan en de lichtere drijven die in het supernatant verschijnen na centrifugatie van de monsters..
- Bereid een zinksulfaatoplossing met een dichtheid van 1,18 of 1,2 g / ml als het monster eerder is behandeld.
- Bereid een rek met eerder gelabelde reageerbuizen voor.
- Heb een centrifugaalmachine.
- Houd microscoopglaasjes en dekglaasjes bij de hand. Ze moeten allemaal worden geëtiketteerd
- Zorg ervoor dat er een Lugol-oplossing beschikbaar is om de lakens te kleuren.
- Heb een gaasje om te filteren.
- Heb trechters en gedestilleerd water.
- Zoek gelabelde plastic of kartonnen containers.
- Ook applicators en steriel handvat van 5 mm.
- Een aansteker om het handvat te steriliseren.
Voor elk ontlastingsonderzoek begint het onderzoek met wat het "macroscopisch onderzoek" van de monsters wordt genoemd..
De consistentie, kleur, de aanwezigheid van wat lijkt op bloed, de aanwezigheid van slijm en de aanwezigheid van volwassen parasieten worden beschreven..
Daarna gaan we verder met het "microscopisch onderzoek" van de ontlasting, dit is afhankelijk van de methode. De eenvoudigste is de directe uitstrijkmethode, de eenvoudigste microscopische observatiemethode voor parasieten..
De procedure omvat het plaatsen van een kleine hoeveelheid van het monster rechtstreeks op een objectglaasje. Plaats enkele druppels zoutoplossing die qua grootte vergelijkbaar moeten zijn met het monster. Meng de zoutoplossing met de ontlasting tot een homogeen mengsel is gevormd. Plaats een dekglaasje en onderzoek onder de microscoop.
De tweede procedure bestaat uit de Faust-flotatiemethode, waarvan de oorspronkelijke versie bestaat uit:
1- Plaats voor dit doel ongeveer twee gram ontlasting in een geschikte bak.
2- Voeg 30 ml zinksulfaatflotatieoplossing toe waarmee een emulsie wordt gemaakt door de oplossing te mengen met de ontlasting.
3- Zeef met een metalen zeef in een tweede container en breng over naar een reageerbuis.
4- Voeg meer flotatieoplossing toe tot er een meniscus in de buis ontstaat.
5- Plaats een glazen dekglaasje op de meniscus. Laat het 10 tot 15 minuten rusten.
6- Verwijder het dekglaasje en plaats het op een objectglaasje, dat onder de microscoop zal worden onderzocht.
Oorspronkelijk maakte de methode geen gebruik van centrifugeren, maar het is nu opgenomen omdat er betere resultaten worden verkregen. De techniek omvat een reeks stappen om tot een juiste procedure te komen, deze zijn als volgt:
1- De ontlasting wordt gewassen met water, goed gemengd en vervolgens gefilterd met in vieren gevouwen gaas. Het monster wordt in een reageerbuis geplaatst.
2- Centrifugeer en verwijder het supernatant (monsters die boven water worden bewaard). Stappen 1 en 2 worden herhaald totdat het supernatant "helder" is.
3- Zinksulfaat wordt aan het gefiltreerde en gecentrifugeerde monster toegevoegd.
4- Mengt goed.
5- Centrifugeer opnieuw gedurende 1 minuut bij 2500 tpm (omwentelingen per minuut).
6- Het supernatant wordt teruggewonnen met een steriele lus van ongeveer 5 mm; buizen mogen niet worden geschud.
7- Het uit het supernatant gewonnen monster wordt op een objectglaasje geplaatst en een druppel Lugol kan op kleur worden geplaatst, het dekglaasje wordt geplaatst en onder de microscoop bekeken.
8- De containers en reageerbuizen zijn gelabeld.
- De elementen die voor de diagnose worden gebruikt, kunnen schoon en zonder “detritus” worden waargenomen, dit vergemakkelijkt de observatie van het blad en vermindert de tijd die nodig is voor de diagnose..
- In het supernatant worden zowel larven, eieren en / of cysten teruggewonnen.
- Het is een zeer goedkope methode.
- De procedure is heel eenvoudig en gemakkelijk te implementeren.
- De diagnose is snel en nauwkeurig.
- Vanwege het belang en de hoge incidentie van parasitose in arme landen, zijn deze goedkope en gebruiksvriendelijke methoden ideaal voor de diagnose en monitoring van deze pathologieën..
De dichtheid van de flotatieoplossing veroorzaakt een samentrekking van de larven, dat wil zeggen dat ze krimpen en in een zeer korte periode kunnen vervormen. Dit dwingt de onderzoeker om de diagnose onmiddellijk te stellen en de behandelde monsters kunnen niet worden bewaard voor toekomstige onderzoeken..
Zoals bij alle microscopische identificatiemethoden, is er zeer ervaren onderzoekspersoneel nodig om nauwkeurige diagnoses te stellen..
De snelle vervorming van de elementen die nodig zijn voor de diagnose, hoewel ze een duidelijk nadeel zijn, kan worden gecorrigeerd door onmiddellijke microscopische waarnemingen te doen.
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.