De voedingsagar Het is een solide, niet-selectief en niet-differentieel kweekmedium. In dit medium groeien allerlei bacteriën die vanuit voedingsoogpunt niet veeleisend zijn..
Het is een eenvoudig medium en bevat, ondanks zijn naam, een lagere voedingswaarde in vergelijking met andere vergelijkbare mediums, zoals Brain Heart Infusion Agar of Trypticase Soy Agar..
Het nut ervan in het laboratorium is zeer gevarieerd. Hoofdzakelijk gebruikt voor onder meer soortsubcultuur, stamonderhoud, kolonie tellen, als basis voor het bereiden van bloedagar..
Evenzo, vanwege de lichtbeige kleur, de productie van pigmenten die worden gegenereerd door sommige bacteriestammen, zoals het groenachtige pigment van Pseudomonas aeruginosa, het steenrode pigment geproduceerd door Serratia marcescens bij kamertemperatuur het goudgele pigment van Staphylococcus aureus, onder andere.
Bovendien is het een van de goedkoopste groeimedia op de markt..
Artikel index
Zoals hierboven al vermeld, is het een heel eenvoudig medium dat is gebaseerd op het leveren van voedingsstoffen voor bacteriegroei zonder beperking en zonder complexe reacties om te interpreteren..
Omdat het medium doorschijnend is, is het ideaal voor het tellen van kolonies door middel van de dieptezaaimethode..
Het bestaat voornamelijk uit vleesextract of gistextract, peptonen of gelatine pancreasverteermiddel, agar-agar, natriumchloride en gedestilleerd water..
Het vlees- of gistextract en de peptonen vertegenwoordigen de essentiële bronnen van koolstof en mineralen (stikstof, fosfor en zwavel), die door bacteriën worden gebruikt als energiebron en groeifactoren..
Evenzo is agar-agar de basis van alle vaste kweekmedia, die gelatine gaan vervangen, de eerste basisverbinding die door Robert Koch werd gebruikt om zijn media een vaste consistentie te geven..
Agar is een polysaccharide dat is samengesteld uit galactose, galactomannan, agarose en agaropectine. Stelt op 40 ° C en smelt bijna 100 ° C.
Natriumchloride van zijn kant geeft het medium de osmolariteit die nodig is voor de ontwikkeling van bacteriën.
Ten slotte dient het water om de gelyofiliseerde verbindingen te hydrateren en op te lossen. Er moet gedestilleerd water worden gebruikt dat is ingesteld op een neutrale pH. Kraanwater mag niet worden gebruikt omdat het calcium en magnesium bevat dat kan reageren met fosfaten in het medium en onoplosbare zouten kan vormen..
Voor één liter voedingsagar moet 31 g van het gedehydrateerde medium worden afgewogen. Het wordt in een kolf gedaan en opgelost in een liter gedestilleerd water. Verhit na 5 minuten staan op een warmtebron en meng constant tot het 1 of 2 minuten kookt..
De kolf wordt vervolgens in een autoclaaf geplaatst en gedurende 20 minuten bij 121 ° C gesteriliseerd..
Aan het einde van de tijd wordt het uit de autoclaaf gehaald en geserveerd in steriele petrischalen, met behulp van een laminaire stroomkap of bunsenbrander..
Als de petrischalen wegwerp (plastic) zijn, moet het medium worden verdeeld wanneer de agar een temperatuur van ongeveer 50 ° C heeft, om te voorkomen dat deze door overmatige hitte vervormd raakt..
Laat stollen en bewaar op een omgekeerde bordenhouder en koel bij 2-8 ° C tot gebruik.
De platen moeten worden getemperd voordat ze worden gezaaid. Voedingsagarplaten mogen niet worden gebruikt als ze vervuild of uitgedroogd zijn.
De pH van het voorbereide medium moet worden ingesteld op 7,3 ± 0,2.
Het is het eenvoudigste kweekmedium dat in het microbiologielaboratorium wordt gebruikt. De formulering is uitstekend voor de groei van niet-veeleisende bacteriën.
De belangrijkste toepassingen worden hieronder uitgelegd:
Dit medium wordt soms gebruikt als basis om bloedagar te bereiden, maar het is niet de meest gebruikte basis..
Dit kweekmedium is vooral nuttig voor het stimuleren van de sporulatie van sporenvormende bacteriën zoals Bacillus sp.
Om dit te doen, een stam van het geslacht Bacil en 24 uur bij 37 ° C in aerobiose geïncubeerd. Zodra de kolonies zijn gegroeid, wordt de plaat onderworpen aan temperatuurstress, dat wil zeggen dat de temperatuur van de oven wordt verhoogd tot 44 ° C en nog eens 24 uur wordt bewaard of 24 uur in de koelkast wordt bewaard.
Aan het einde van de tijd worden uitstrijkjes van de cultuur gemaakt en gekleurd met Gram-kleuring of met Shaeffer-Fulton-sporenkleuring. Daarin worden de bacillen met endosporen (sporen in de bacil) en exosporen (sporen buiten de bacil) waargenomen..
Sommige onderzoekslaboratoria of universitaire onderwijsondersteunende laboratoria vereisen het zo lang mogelijk in stand houden van levensvatbare bacteriën van klinisch belang, om de bacteriënbank (bacterioteca) te gebruiken voor onderzoekswerk of voor de voorbereiding van onderwijspraktijken, waar de studenten zullen leren manipuleren en identificeer deze micro-organismen.
Voor dit doel kunnen zowel voedingsagar als hersen-hartinfusie-agar worden gebruikt. De agar wordt bereid, in kokers met bakelieten deksel gegoten en gekanteld op een ondergrond, zodanig dat de agar stolt en een blok vormt aan de onderkant en een schuine kant op het oppervlak (fluitbek).
Elke buis is gelabeld met de naam van de te zaaien bacteriën en de datum. Elk van de bacteriën wordt op de ring gezaaid en gedurende 24 uur geïncubeerd, zodra de kolonies zijn gegroeid, worden de buisjes bij kamertemperatuur bewaard.
De bacterioteca moet worden vernieuwd van 1 tot 3 maanden, om besmetting en uitdroging van het medium en evenals de dood van de bacteriën te voorkomen.
Alleen niet-kieskeurige bacteriën kunnen op deze manier in stand worden gehouden.
Hoewel er gespecialiseerde middelen zijn voor het tellen van kolonies, zoals standaard agar-agar, kan voedingsagar voor dit doel worden gebruikt, hetzij door aan het oppervlak te zaaien met een drigalski-spatel of op diepte. Om deze reden is het erg nuttig bij de microbiologische analyse van voedsel en water..
Omdat het een medium is dat geen bloed of enig ander additief bevat, is het ideaal voor het nemen van kolonies die op dit medium zijn gekweekt om de catalase-test uit te voeren..
Evenzo is het, vanwege zijn lichte kleur, aangewezen om oxidase-testen rechtstreeks uit te voeren op een gebied van de gezaaide agar, zonder interferentie..
De voedingsagar bereid met 10% zeewater is nuttig voor de evaluatie van mesofiele aëroben in strandwateren..
Op deze manier kan de werkelijke mate van verontreiniging die de wateren hebben met deze micro-organismen worden ingezien, aangezien bij dit type monsters de resultaten overlappen wanneer op de conventionele manier bereide kweekmedia worden gebruikt..
Dit werd aangetoond door Cortez et al. in 2013 in een onderzoekswerk.
Dit kan worden verklaard door de abrupte verandering die bacteriën ondergaan wanneer ze van een hyperzoute omgeving naar een zoutarme omgeving gaan, daarom komen de micro-organismen in een toestand van lethargie terecht waarin ze levensvatbaar zijn, maar niet te kweken..
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.