De nefelometrie bestaat uit het meten van de straling veroorzaakt door deeltjes (in oplossing of in suspensie), dus het meten van het vermogen van de verstrooide straling onder een andere hoek dan de richting van de invallende straling.
Wanneer een zwevend deeltje wordt geraakt door een lichtstraal, wordt een deel van het licht gereflecteerd, een ander deel wordt geabsorbeerd, een ander wordt afgebogen en de rest wordt doorgelaten. Dit is de reden waarom wanneer het licht een transparant medium raakt waarin zich een suspensie van vaste deeltjes bevindt, de suspensie troebel lijkt..
Artikel index
Op het moment dat een lichtstraal de deeltjes van een stof in suspensie raakt, verandert de voortplantingsrichting van de straal van richting. Dit effect is afhankelijk van de volgende aspecten:
1. afmetingen van het deeltje (grootte en vorm).
2. kenmerken van de suspensie (concentratie).
3. golflengte en lichtintensiteit.
4.Incident lichte afstand.
5. detectiehoek.
6. brekingsindex van het medium.
De nefelometer is een instrument dat wordt gebruikt om zwevende deeltjes in een vloeibaar monster of in een gas te meten. Dus een fotocel die onder een hoek van 90 ° ten opzichte van een lichtbron is geplaatst, detecteert straling van deeltjes die in de suspensie aanwezig zijn..
Ook het licht dat door de deeltjes naar de fotocel wordt gereflecteerd, is afhankelijk van de dichtheid van de deeltjes. Diagram 1 toont de basiscomponenten waaruit een nefelometer bestaat:
Bij nefelometrie is het van levensbelang om een stralingsbron te hebben met een hoge lichtopbrengst. Er zijn verschillende soorten, variërend van xenonlampen en kwikdamplampen, wolfraamhalogeenlampen, laserstraling, onder anderen..
Dit systeem bevindt zich tussen de stralingsbron en de cuvette, zodat op deze manier straling met verschillende golflengtes ten opzichte van de gewenste straling op de cuvette wordt vermeden..
Anders zouden fluorescentiereacties of verwarmingseffecten in de oplossing afwijkingen van de meting veroorzaken..
Het is over het algemeen een prismatische of cilindrische houder en kan verschillende afmetingen hebben. Hierin vindt u de oplossing die wordt bestudeerd.
De detector bevindt zich op een specifieke afstand (meestal zeer dicht bij de cuvet) en is verantwoordelijk voor het detecteren van de straling die wordt verstrooid door de deeltjes in de suspensie..
Over het algemeen is het een elektronische machine die gegevens ontvangt, converteert en verwerkt, in dit geval de metingen die zijn verkregen uit de uitgevoerde studie..
Elke meting is onderhevig aan een foutpercentage, dat voornamelijk wordt bepaald door:
Verontreinigde cuvetten in de cuvetten vermindert elk middel buiten de onderzochte oplossing, zowel binnen als buiten de cuvet, het stralingslicht op weg naar de detector (defecte cuvetten, stof dat aan de wanden van de cuvet kleeft).
Interferentie de aanwezigheid van een microbiële verontreiniging of troebelheid verspreidt de stralingsenergie, waardoor de intensiteit van de verspreiding toeneemt.
Fluorescerende verbindingen: dit zijn die verbindingen die, wanneer ze worden geëxciteerd door invallende straling, foutieve en hoge verstrooiingsdichtheidswaarden veroorzaken.
Opslag van reagentia een onjuiste systeemtemperatuur kan ongunstige studieomstandigheden veroorzaken en de aanwezigheid van troebele of neergeslagen reagentia aanwakkeren.
Schommelingen in elektrisch vermogen Om te voorkomen dat invallende straling een bron van fouten is, worden spanningsstabilisatoren aanbevolen voor uniforme straling.
Omdat het stralingsvermogen van de gedetecteerde straling recht evenredig is met de massaconcentratie van de deeltjes, hebben nefelometrische studies -in theorie- een hogere metrologische gevoeligheid dan andere vergelijkbare methoden (zoals turbidimetrie).
Bovendien vereist deze techniek verdunde oplossingen. Hierdoor kunnen zowel absorptie- als reflectieverschijnselen worden geminimaliseerd..
Nefelometrische studies nemen een zeer belangrijke plaats in in klinische laboratoria. Toepassingen variëren van de bepaling van immunoglobulinen en acute-fase-eiwitten, complement en coagulatie.
Wanneer een biologisch monster een antigeen van belang bevat, wordt het gemengd (in een bufferoplossing) met een antilichaam om een immuuncomplex te vormen..
Nefelometrie meet de hoeveelheid licht die wordt verstrooid door de antigeen-antilichaamreactie (Ag-Ac), en op deze manier worden immuuncomplexen gedetecteerd.
Dit onderzoek kan op twee manieren worden uitgevoerd:
Deze techniek kan worden gebruikt voor eindpuntanalyse, waarbij het antilichaam van het bestudeerde biologische monster 24 uur wordt geïncubeerd..
Het Ag-Ac-complex wordt gemeten met een nefelometer en de hoeveelheid verstrooid licht wordt vergeleken met dezelfde meting die werd uitgevoerd voordat het complex werd gevormd..
Bij deze methode wordt de snelheid van complexvorming continu gevolgd. De reactiesnelheid is afhankelijk van de concentratie van het antigeen in het monster. Hier worden de metingen gedaan als een functie van de tijd, dus de eerste meting wordt gedaan op het tijdstip "nul" (t = 0).
Kinetische nefelometrie is de meest gebruikte techniek, aangezien het onderzoek in 1 uur kan worden uitgevoerd, vergeleken met de lange tijdsperiode van de eindpuntmethode. De dispersieverhouding wordt gemeten net na het toevoegen van het reagens.
Daarom wordt, zolang het reagens constant is, de hoeveelheid aanwezig antigeen als rechtevenredig beschouwd met de snelheid van verandering.
Nefelometrie wordt over het algemeen gebruikt bij de analyse van de chemische kwaliteit van water, om de duidelijkheid te bepalen en om de behandelingsprocessen ervan te beheersen..
Het wordt ook gebruikt om luchtverontreiniging te meten, waarbij de concentratie van de deeltjes wordt bepaald uit de dispersie die ze produceren bij invallend licht..
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.