Bengalen stond op Het is een laboratoriumtest op basis van een antigeen-antilichaamreactie voor de diagnose van brucellose. Met deze techniek kunnen specifieke antilichamen tegen de bacteriën worden opgespoord Brucella abortus in monsters van menselijk serum. Het resultaat kan kwalitatief of semi-kwantitatief worden gerapporteerd.
De kwalitatieve vorm geeft aan of de patiënt positief of negatief is voor de test, dat wil zeggen of er al dan niet antilichamen zijn. Ondertussen wordt het semi-kwantitatieve rapport gerapporteerd in IE / ml en geeft het de geschatte hoeveelheid aanwezige antilichamen aan. Opgemerkt moet worden dat antilichamen alleen worden geproduceerd als de patiënt in contact is geweest met het micro-organisme.
Vanwege zijn grote eenvoud, hoge gevoeligheid en specificiteit, is het een van de seroagglutinatietechnieken die in de geneeskunde het meest worden gebruikt als een eerste test voor de diagnose van deze ziekte..
Sommige onderzoekers hebben de werkzaamheid van de Rose Bengal-test vergeleken met andere technieken, zoals sero-agglutinatie (febriele antigenen) en hebben opgemerkt dat hoewel er een goede correlatie is, ze geïsoleerde gevallen zagen waarin de febriele antigeentest negatief was en Rose de Positive flare.
Het verkregen verschil was te wijten aan het feit dat deze patiënten een subklasse van IgG-antilichamen tegen hadden Brucella abortus met een betere bindingscapaciteit bij zure pH, daarom konden ze reageren met het Rose Bengal-reagens maar niet met dat van febriele antigenen.
In die zin hebben ze gesuggereerd dat de reagentia van de febriele antigeentechniek worden gemodificeerd tot een zure pH, zodat ze dit soort gevallen kunnen detecteren..
Artikel index
Het Rose Bengal-reagens bestaat uit een antigene suspensie. Het bestaat uit de S99-stam van Brucella abortus, verdund in een zure lactaatbuffer (pH 3,6), plus fenol en de Bengaalse Rose kleurstof.
Daarom wordt in het monster gezocht naar anti-Brucella-antilichamen, als deze aanwezig zijn, zullen ze reageren met het reagensantigeen en zal een macroscopisch zichtbare agglutinatiereactie worden waargenomen. De test detecteert IgM-antilichamen of IgG-antilichamen.
Dit betekent dat het de ziekte kan detecteren in zowel het acute stadium waarin IgM-antilichamen de overhand hebben, als in het chronische stadium waarin IgG-antilichamen de overhand hebben..
Dit is een voordeel omdat het de gevoeligheid van de test verhoogt, maar tegelijkertijd is het een nadeel omdat het geen onderscheid maakt tussen de ene fase en de andere, omdat de reactie met IgM- en IgG-antilichamen identiek is..
De test moet altijd samen met een negatieve controle en een positieve controle worden uitgevoerd. De negatieve controle bevat dierlijk serum zonder antilichamen en de positieve controle bevat serum van dierlijke oorsprong met 50 IE / ml anti-Brucella-antilichamen..
Brucellose is een ernstige ziekte die vaak chronisch en gevaarlijk is, dus het is erg belangrijk dat deze vroegtijdig wordt gediagnosticeerd. Het is een zoönose en mensen kunnen worden besmet door direct contact met besmet materiaal, met als meest kwetsbare mensen dierenartsen en dierenhouders..
Infectie kan ook optreden door het consumeren van geïnfecteerd rauw vlees, naast andere vormen van besmetting.
Deze ziekte valt lokaal of systemisch aan. De systemische vorm is de meest ernstige, aangezien verschillende organen kunnen worden aangetast, waaronder het reticulum-endotheliale systeem (lever, milt, beenmerg), huid (cellulitis en lymfadenopathie), ademhalingssysteem (pneumonie), bewegingsapparaat (artritis, sacroiliitis en spondylitis ), onder andere.
De Bengaalse Rose-test is een zeer nuttige techniek om een eerste screening uit te voeren, omdat deze erg goedkoop, gemakkelijk te gebruiken en met een grote specificiteit en gevoeligheid is..
Gevallen van fout-negatieven en fout-positieven zijn zeer zeldzaam en kunnen voorkomen bij mensen met zeer lage antilichaamtiters (< 25 UI/ml) o extremadamente altos (>1000 IU / ml) respectievelijk.
-Rose Bengal Kit
-Agglutinatie plaat witte achtergrond
-Pipet van 50 µl
-Rotator (optioneel)
-Vortex
Commerciële Rose Bengal-kits worden geleverd met gebruiksklare reagentia.
-Tempereer reagentia voordat u met het werk begint.
-Op de agglutinatieplaten zijn cirkels getekend, elk voor een ander monster. Gebruik 3 cirkels, de eerste voor de negatieve controle, de tweede voor het monster en de derde voor de positieve controle.
-Plaats een druppel of 50 µl van de controles en het monster in hun overeenkomstige cirkel.
-Meng het Rose Bengal-reagens met een vortex. Plaats een druppel naast de eerder geplaatste.
-Meng met houten tandenstokers (gebruik er een voor elk exemplaar of controle). Maak cirkelvormige bewegingen en spreid zo uit dat het de hele cirkel beslaat.
-Plaats de plaat op een automatische rotator op 80 tot 100 RPM of draai handmatig gedurende 4 minuten. Lees het bewijs aan het einde van deze tijd.
-Controleer of de bedieningselementen gaven zoals verwacht. Vergelijk de reactie van het testmonster met de controles. Rapporteer als positief als agglutinatie wordt waargenomen en als negatief als er geen agglutinatie is.
Een positieve test geeft aan dat de patiënt een hoeveelheid heeft gelijk aan of groter dan 25 IE / ml anti-Brucella-antilichamen.
Als in de kwalitatieve reactie het monster sterk positief is, kan het semi-gekwantificeerd worden. Hiervoor worden seriële dubbele verdunningen van het monster gemaakt met fysiologische zoutoplossing. De hierboven beschreven procedure wordt bij elke verdunning uitgevoerd..
Het wordt ook geïnterpreteerd door de agglutinatie macroscopisch te observeren. Het resultaat is de titer van de hoogste verdunning waarin een positief resultaat werd waargenomen.
Om de geschatte waarde van anti-Brucella-antilichamen te berekenen, wordt de volgende formule gebruikt:
25 IU / ml x reactietiter = IU / ml
Als een patiënt in de semi-kwantitatieve test bijvoorbeeld positief test bij de ½, ¼ en 1/8 verdunning en negatief begint te worden vanaf de 1/16 verdunning, betekent dit dat de patiënt een titer heeft van 8.
De formule toepassen:
25 IU / ml x 8 = 200 IU / ml
-De kits hebben een vervaldatum en deze moet worden gerespecteerd. Mag niet worden gebruikt als het reagens is verlopen.
-Zorg ervoor dat het reagens tijdens gebruik geen vaste deeltjes bevat, aangezien dit een teken van bederf is..
-Bewaren tussen 2 en 8 ° C.
-Niet in de vriezer bewaren, deze handeling beschadigt het reagens onherstelbaar.
-Voer de test altijd samen met de negatieve en positieve controles uit.
-De techniek verdraagt serummonsters met een zekere mate van lipemie en hemolyse, maar het is niet aan te raden overdreven lipemische en gehemolyseerde sera te gebruiken, beide condities veranderen de resultaten van de test..
-Warm de reagentia altijd op tot kamertemperatuur voordat u met de analyse begint..
-Interpreteer geen reacties die langer duren dan de aanbevolen tijd, aangezien dit het rapport van vals-positieven genereert, aangezien na een bepaalde tijd het reagens neerslaat, wat een positieve reactie simuleert.
-De techniek is 100% gevoelig en heeft een specificiteit van 98%.
-Na een semi-kwantificering van 1000 IU / ml is er de mogelijkheid om een prozone-effect waar te nemen (vals negatief door overmaat antilichaam vergeleken met de hoeveelheid antigenen).
Niemand heeft nog op dit artikel gereageerd.